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島津液相色譜儀的日常應用維護
2011-11-04 [10018]

摘要

島津液相色譜儀的日常維護,很實用。

內容

島津液相色譜儀的日常應用維護

島津液相色譜儀的日常應用維護

、津掖相色譜儀的日常分析注意事項

1.關于試劑
試劑類別:有機溶劑 無機化合物
試劑的要求:(1)有機溶劑的級別HPLC以上試劑。
2)無機化合物要求分析純以上。
3 水要求是去離子純凈水。

2.流動相
要求: 1)無氣泡,通過超聲脫氣,通氦氣等方法進行脫氣。
2)純凈無雜質,常用方法為用0.45微孔過濾膜進行過濾。

3 ODS柱的注意事項
1 壓力 注意每根柱的耐壓(zui大使用壓力)。
2 PH的范圍 不同柱子的PH值范圍有所不同。
3 清洗 柱子需要必要的清洗,請用戶參考柱子的說明書。
4 保存 長時間不使用柱子時需要合適的試劑進行保存,請參考柱子的說明書。

4 樣品的注入方式及進樣量
1)注入方式 INJ位置將進樣針插入,然后再將手柄扳到Load位,在Load位時將樣品勻速推入定量環,在從Load位扳到INJ位置即完成進樣過程。
2)進樣量 對于20微升定量環,進樣量20微升以下,5微升以上可用微量注射針進樣(看刻度)。5微升以下可能回會造成樣品重復性變差。20 微升以上(利用定量環)建議用戶注射量為定量環的3倍以上,即大于60微升。
以上建議主要是減少進樣誤差,提高重復性。

5 檢測器的背壓及各種檢測池的耐壓
1)紫外檢測器 耐壓< 30kg/cm2f
2)檢測器熒光 耐壓< 30kg/cm2f
3)示差檢測器 耐壓< 30kg/cm2f
檢測器后面加一些背壓主要目的是防止氣泡滯留在檢測器中。

二、液相色譜的常見故障及排除方式
1
        關于吸濾過濾器堵塞
現象: 塞吸現象、管路中不斷產生氣泡
處理方式:將吸濾頭1從溶劑管中拔出,放在正己烷
或稀硝酸(一般<10%)中超聲清洗。
2
        在線過濾器堵
現象: 不連接柱子及管路、混合器(松開泵進混合器或柱子的管路接頭),設定泵流速為1ml/min,泵壓力大于0.3MPa,說明在線過濾器堵。
處理方式: 一般建議用戶更換新的過濾器,儀器型號:LC-10ADVP, LC-10ATVP, LC-20ALC-20AD, LC-10AT, LC-8A, LC-6AD等可以將在線過濾器拆下,用稀硝酸(濃度小于10%),進行超聲清洗。

3        壓力波動的原因及處理方法
產生波動的原因: 有氣泡
密封圈有磨損,產生微量的泄液
進口單向閥中有異物(較常見)
在線過濾器,管路,柱子進口處有鹽析出或雜物

處理方法: 流動相進行脫氣,排除流路中的氣泡
更換密封圈
清洗進出口單向閥,將單向閥置于燒杯中,用異丙醇進行超聲清洗
檢查并清洗過濾器及流路

4        混合器堵及解決方法
雙泵高壓梯度系統有高壓混合器,長時間使用后會產生不同程度的內部過濾器堵。
處理方法:
1)先把混合器的預混合腔整體拆下,再拆下1號和2號處。
2)建議用戶不可拆開2號和3號之間的連接。
3)取出混合器內部的過濾器5-1
4)將過濾器置于稀硝酸中進行超聲清洗。
5
、引起柱壓升高的原因
色譜柱長時間使用后用戶發現柱壓比以往要高出許多,造成此情況可能由以下幾個因素引起。
1        在線過濾器堵。
2        高壓混合器堵。
3        進樣器堵。
4        流路中部分細管堵。
5        流通池堵
6        柱子內部吸附樣品產生堵
確認發法:進行分段檢測,確認的確是柱子壓力高還是以上5點原因中某個引起的。
6
、進樣峰分叉的原因
A)        
流路及柱子等沒有做任何改變的情況下,分析樣品時,被檢測峰產生分叉,則說明保護柱或分析柱柱效下降,需再生保護柱或分析柱。
B)        
柱的出口到檢測池的管路偏長或管路內徑寬所致(常用內徑0.3mm以下),導致樣品擴散,造成峰分叉。
7
        什么情況下需更換D2 Lamp
A)        
SPD-10A, SPD-10Avp,SPD-20A上查看參比池的能量,若能量值(REF EN )偏低(220nm時),一般在400以下,則被認為需要更換氘燈。
B)        
顯示D2 Lamp ERROR時,一般情況下認為氘燈不良需更換。
C)        
氘燈超過使用時間(zui多2000小時),需要更換氘燈。
8
        造成檢測池能量低的原因
A.        
氘燈使用時間過長(大于2000小時),燈老化所致
B.        
光路系統受到污染或老化
說明:檢測池能量高低以參比池為準。

9        檢測池中有氣泡如何排除
1
一般情況下,很小的氣泡會停留在檢測池中,所以需要在池管路出口1處加一個背壓管,池中氣泡不易在池中產生。(加背壓:出口處加上一段阻尼管增加壓力)
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10
        如何清洗流通池
一般情況下,請用戶不要將池拆散,而是用儀器附帶的工具進行清洗。 常用流程:水-----甲醇-----異丙醇-----甲醇,或再用稀硝酸沖洗池流路。

11        基線漂移,噪音增大的原因。
1
        所用試劑不純
2
        整個流路系統不干凈
3
        流動池污染
4
        氘燈使用時間過長
5
        電壓不穩,或者有環境干擾
6
        柱子污染等因素

12        梯度洗脫時可能產生的干擾峰
在進行梯度洗脫時,由于溶劑的變化,導致吸光度背景值的該改變。所以會產生基線上下波動,這是正常現象。由于不斷的洗脫。特別是水及無機鹽混合的流路,流過柱子后部分雜質被柱子吸附,隨著體系洗脫液極性的變化,以及在不同的檢測波長下,某些成分被檢測,導致在沒有進樣情況下,基線上出現峰,即被認為干擾峰。

13        ODS柱的再生
ODS
柱子使用一段時間后可能會導致柱效下降,此時需要對柱子進行再生,提高柱效。
1.        
甲醇沖洗半小時
2.        
三氯甲烷沖洗十分鐘
3.        
異丙醇沖洗十分鐘
4.        
三氯甲烷沖洗十分鐘
5.        
甲醇沖洗半小時
說明:柱使用時間的長短與被分離的樣品有很大的關聯,所以碰到像生物樣品、血制品、發酵產品等中均含有不同程度的蛋白質及大分子量的組分,柱子很容易損壞,柱效易下降。這種情況下用以上方式進行再生幾乎沒有明顯的改變。

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